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完好的人ELISA試劑盒包含哪些組分呢?

更新時(shí)間:2019-10-26      瀏覽次數(shù):814
   完好的人ELISA試劑盒包含哪些組分呢?
  在人ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中,只需遵從它應(yīng)有的規(guī)矩才干更好的完成實(shí)驗(yàn),對(duì)此,為您分析了保證實(shí)驗(yàn)效果的幾大基礎(chǔ):
  1.要在實(shí)驗(yàn)前1小時(shí)將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都康復(fù)到室溫,以使效果更安穩(wěn)。
  2.實(shí)驗(yàn)時(shí),要使底物避光保存。
  3.用槍羅致液體時(shí)速度不能太快,避免發(fā)作氣泡而使羅致量不。
  4.羅致液體時(shí),要用量程和需要量靠近的槍去吸,削減過(guò)失。
  5.要保證移液槍的性,過(guò)失不能超過(guò)2%??捎盟碗娮犹炱竭M(jìn)行確認(rèn)。但有專(zhuān)。人員進(jìn)行糾正。
  6.要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。羅致不同的液體后,要更換槍頭。即使是羅致標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)。
  ELISA中有三個(gè)必要的試劑:免疫吸附劑、結(jié)合物和酶的底物等
  完好的人ELISA試劑盒包含以下各組分:
  1.已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑)
  2.酶符號(hào)的抗原或抗體(結(jié)合物);
  3.酶的底物;
  4.陰性對(duì)照品和陽(yáng)性對(duì)照品(定性測(cè)定中),參考規(guī)范品和控制血清(定量測(cè)定中);
  5.結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液;
  6.洗刷液
  7.酶反響停止液。
  人ELISA試劑盒操作過(guò)程:
  1. 加規(guī)范品:在酶標(biāo)包被板上設(shè)規(guī)范品孔,依次參加不同濃度的規(guī)范品50ul(主張每個(gè)濃度做2個(gè)平行孔)
  2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其他各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品40μl,然后再加樣品親和素10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,悄悄晃動(dòng)混勻。
  3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
  4. 配液:將30倍濃縮洗刷液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
  5. 洗刷:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗刷液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
  6. 加酶:除空白孔外每孔參加酶標(biāo)試劑50μl。
  7. 溫育:操作同3。
  8. 洗刷:操作同5。
  9. 顯色:ELISA試劑盒每孔先參加顯色劑A50μl,再參加顯色劑B50μl,悄悄震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
  10. 停止:每孔加停止液50μl,停止反響(此刻藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
  11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序丈量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加停止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。
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